RU EN
Интернет-портал Российского общества клинической онкологии

Мероприятия Общества

Тематический семинар
«Применение метода ПЦР в реальном времени (real-time PCR)
для выявления соматических мутаций» (72 часа)

Москва, 19-30 сентября 2016 г.

Организатор: Российское общество клинической онкологии


Программа

  Тема занятий Часы
1 Регистрация участников обучения. Анкетирование.
Приветственное слово. Прием и обработка документов
1
Лекции
2 Основы метода Полимеразной Цепной Реакции (ПЦР) 2
3 Электрофорез, секвенирование. ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией и ПЦР в режиме реального времени (Real-Time ПЦР) 3
4 Комплексное оснащение ПЦР-лаборатории 2
5 Методы предобработки клинического материала и выделение нуклеиновых кислот (ДНК/РНК) 3
6 Организация санитарно-противоэпидемического режима в лабораториях 2
7 Принципы правильной организации работ (GLP) в ПЦР-лаборатории. 3
8 Соматические мутации в онкогенах. Лабораторные исследования in vitro с использованием ПЦР в реальном времени 2
9 Молекулярно-генетические исследования в диагностике и лечении онкологических заболеваний 2
10 Метод пиросеквенирования для выявления соматических мутаций 2
Практические занятия
11 Демонстрация: Выделение РНК набором «РИБО-преп» и постановка ПЦР на панели стандартных клинических образцов (Real Time) 3
12 Самостоятельная работа
Выделение РНК набором «РИБО-преп» и постановка ПЦР на панели стандартных клинических образцов (Real Time)
4
13 Самостоятельная работа
Подготовка клинического материала при экстракции ДНК из крови. Работа с гемолитиком. Выделение НК с помощью комплекта «РИБО-преп»
4
14 Самостоятельная работа
Удаление парафина. Лизирование образца в присутствии протеиназы К.
2
15 Самостоятельная работа
Нагрев: инкубирование при 90°С для удаления перекрестного связывания ДНК с формалином
2
16 Самостоятельная работа
Связывание: ДНК связывается с мембраной. Промывка: удаление остаточных примесей. Элюирование: получение чистой концентрированной ДНК. Определение суммарной ДНК в пробах
3
17 Самостоятельная работа
Проведение аллель-специфической ПЦР на мутации в гене EGFR
3
Семинары
18 Порядок действий при запуске прибора. Редактирование программы амплификации и детекции прибора. Редактирование таблицы образцов. Расчет и анализ результатов 4
19 Самостоятельная работа: запуск программы, обработка результатов 3
20 Работа с инструкцией QIAamp DNA FFPE Tissue. Связывание: ДНК связывается с мембраной. Промывка: удаление остаточных примесей. Элюирование: получение чистой концентрированной ДНК 4
21 Определение суммарной ДНК в пробах для выбора оптимального разведения ДНК с помощью контрольной ПЦР. Разбор практической работы: проведение аллель-специфической ПЦР на мутации в гене EGFR 4
22 Самостоятельная работа с прибором RG Q. Порядок действий при запуске прибора. Редактирование программы амплификации и детекции прибора. Редактирование таблицы образцов 4
23 Выявление мутаций в гене EGFR и анализ данных. Порядок действий при запуске прибора. Редактирование программы амплификации и детекции прибора. Редактирование таблицы образцов. Расчет и анализ результатов 5
24 Экзамен
Определение суммарной ДНК в пробах. Выявление мутаций в гене EGFR и анализ данных (ситуационные задачи)
3
25 Итоговое собеседование. Экзамен. Выдача документов 2